肿瘤耐药细胞株的建立及鉴定

  小编就以逐步增加培养基中阿霉素浓度的方法，诱导出一株耐ADM的人源性白血病细胞株为例。

    1.细饱培养和阿霉素人工细饱系的建立方法:K562细胞用含10%小牛血清的培养基，
    2.生长抑制实脸:采用接入法分别测定抑制50%细胞生长所需的ADM, DNR. HHT. VCR, AMSA, VP-16及Am一C, 5一FU, MTX和DDP等的浓度，耐药倍致为K562/A02与亲代K562的浓度之比。
    3.掩蛋白P一170的检侧:采用活细施间接免度荧光法和免皮组织化学法。
    4.细胞内药物浓度侧定:采用HPLC法。
    5.ndrl和mdr2其因扩增与转录的侧定:ndrl和.dr2的cDN分别用此切片作探针进行狭缝杂文。
    实验结果
    K562IA02细胞系的耐药谓:用H一TdR接入法分别测定不同药物的发现K562/A02对ADM的耐药倍效为60倍。对与ADM的结构及药理特性相似(DNR)抓取程度不同的较强的耐药性，表现为典型的多药耐药农型。