都把细胞当成自己的娃,
娃生活地怎么样,心情好不好,
快不快乐,是每天都要关注的事情。
因为担心一不留神,
细胞娃就生存地不好,
甚至于受到污染,细胞 over 了!
如何让细胞快乐,我们一起往下看!
1. 确保所有实验室材料都无菌
交叉污染是细胞培养的大敌。即使是轻微的污染,也可能毁了几个星期的成果。因培养箱内温暖潮湿,真菌易生长,因此必须注意定期清洁。此外,在将培养瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,应用酒精擦拭干净,以避免污染。
2. 小心处理您的培养物
细胞培养的脆弱性怎么强调也不为过。剧烈摇晃,或连续的温度波动可能会对生长产生不利的影响。确保培养箱是水平的,温度均一,且远离电动仪器。此外,尽量避免一次处理多个
细胞系,因为它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定期完成 STR 图谱分析,以确认细胞系的身份。
3. 在使用前正确解冻细胞
尽管解冻看起来是个简单的步骤,但必须操作得当,以免伤害细胞。长时间暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因此,冻存管应当在 37°C 水浴中放置 2 分钟,然后用条件培养基稀释,以避免 DMSO 造成直接伤害。
4. 使用对数生长期的细胞
细胞培养过程共有 3 个阶段:停滞期、对数期和平台期,分别代表了低细胞生长、高细胞生长和无细胞生长。有活力的细胞是健康的,快速分裂的,在对数期以 70-80% 的汇合度存在。